Aglutinação 2h683f

UNIVERSIDADE FEDERAL DA BAHIA INSTITUTO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE – ICS DEPARTAMENTO DE BIOINTERAÇÃO DISCIPLINA: IMUNOLOGIA I – ICS 045

Trabalho realizado pelo Acadêmico de Medicina Veterinária da UFBA José Tadeu Raynal, sob orientação dos Professores Robert Schaer, Roberto Meyer, Claudia Brodskin e Ricardo Portela. Atualizado em Fevereiro de 2010.

• As reações de aglutinação decorrem da ligação entre o Ac e Ag particulado. • É o agrupamento de partículas, usualmente por moléculas de Ac, que se ligam a Ag na superfície de partículas adjacentes.

• Agregação visível de partículas

Eritrócitos Bactérias Fungos Látex

o Fatores que influenciam a formação dos agregados • Classe do anticorpo envolvido. • Concentração iônica e pH do meio. • Presença de macromoléculas, íons, enzimas e conservantes. • Tempo e temperatura. • Padronização adequada da suspensão de micropartículas ou células. • Concentração ótima de antígeno ou Ac a ser fixado nas micropartículas ou células. • Estabilidade da ligação do Ag/Ac e ibilidade dessa molécula nas micropartículas ou células.

o Vantagens: • Baixo custo. • Boa especificidade. • Leitura visual. • Facilidade de execução.

o Desvantagens: • Baixa sensibilidade. • Reprodutibilidade dos lotes de reagentes. • ibilidade molecular para interação Ag-Ac. • Estabilidade da ligação do Ag/Ac no e.

• Neste teste, o antígeno faz parte naturalmente da célula, e haverá aglutinação dessas células promovida por anticorpo contra esses antígenos (antígeno é naturalmente insolúvel).

Anticorpo

Antígeno

Complexo precipitado

Ex: Identificação de antígenos eritrocitários na tipagem sanguínea, reação de Widal (febre tifóide).

• Na reação de aglutinação direta utilizam-se partículas antigênicas insolúveis em sua forma íntegra ou fragmentada. Hemácias, bactérias, fungos, protozoários podem ser aglutinados diretamente por anticorpo. Os testes para detectar anticorpos específicos são realizados empregando-se diluições em série do anticorpo, frente a uma quantidade constante de antígeno. Após um período de incubação, a aglutinação se completa e o resultado é geralmente expresso como o título do anti-soro, isto é, a máxima diluição em que ocorre a aglutinação.

Tipagem ABO Testes confirmatórios para sífilis Aglutinação bacteriana Presença de infecção Diferenciação de espécies

Salmonelose aviária Coriza infecciosa das galinhas Micoplasmose Brucelose

• Tipagem ABO

• Esse método emprega a adsorção de anticorpos ou antígenos protéicos solúveis na superfície de micropartículas inertes (e). • Para o teste, as hemácias e as partículas inertes (látex, leveduras, etc.) podem ser sensibilizadas por adsorção iva, devida ao contato direto com os antígenos solúveis, por adsorção via agentes químicos, como ácido tânico, cloreto de cromo e por conjugação do antígeno, por meio de ligações químicas covalentes, fornecendo reagentes estáveis. Devido à grande diversidade de antígenos que podem se ligar às células ou partículas, a aplicação dos testes de aglutinação iva é muito variada.

+

• Teste de gravidez NEGATIVO

POSITIVO Soro anti hCG

+

Ac

Incubados e colocados em placa

Soro anti hCG

Urina

+ hCG

Particulas revestidas com hCG

Positivo não aglutina, pois os Ac se ligaram ao hCG da urina na incubação

+ Urina Ac

+

Incubados e colocados em placa

Negativo aglutina

• Ac antiimunoglobulinas (Robert Coombs). • Doença Hemolítica do Recém Nato – mãe produz IgG anti-Rh (DHRN) • Não aglutinam os eritrócitos. • Direto: Ac ligados aos eritrócitos fetais. • Indireto: Ac anti-Rh não aglutinantes no soro materno. • Permite detectar incompatibilidades Rh, prevenindo contra DHRN.

O efeito PRÓ-ZONA ocorre devido ao excesso de anticorpos na amostra, que ocorre nos soros fortemente reagentes. Pode ocasionar resultados FALSO-NEGATIVOS. Para evitar o efeito pró-zona, emprega-se soro diluído.

Ocorre FALSO-POSITIVOS