Kromatografi i1e5m

BAB 1 PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang Kromatografi adalah suatu metode pemisahan campuran senyawa atau komponen tersebut antara dua fase. Dua fase tersebut adalah fase diam (adsorben atau lapisan penyerap) dan fase gerak (eluen). Fase diam bertindak sebagai pemisah campuran tersebut. Sedangkan fase gerak adalah yang bertindak sebagai pembawa campuran tersebut. Komponen-komponen campuran akan bergerak dengan kecepatan yang berbeda-beda akibat hambatan dari fase diam, sehingga akan terjadi pemisahan. Kromatografi kertas termasuk dalam kelompok kromatografi planar, di mana pemisahnya menggunakan medium pemisah dalam bentuk bidang (umumnya bidang datar) yaitu bentuk kertas. Seluruh bentuk kromatografi memiliki fase diam (berupa padatan atau cairan yang didukung pada padatan) dan fase gerak (cairan atau gas). Fase gerak mengalir melalui fase diam dan membawa komponen-komponen dari campuran bersama-sama. Komponen-komponen yang berbeda akan bergerak pada laju yang berbeda pula. Pada kromatografi kertas peralatan yang dipakai tidak perlu alat-alat yang teliti atau mahal. Hasil-hasil yang baik dapat diperoleh dengan peralatan dan materi-materi yang sangat sederhana. Senyawa-senyawa yang terpisahkan dapat dideteksi pada kertas dan dapat segera diidentifikasi. Bahkan jika dikehendaki, komponen-komponen yang terpisahkan dapat diambil dari kertas dengan jalan memotong-motongnya, kemudian larutkan secara terpisah. Oleh karena itu, dilakukan percobaan mengenai kromatografi ini untuk memisahkan campuran yang didasarkan pada perbedaan kecepatan migrasi komponen-komponen yang dipisahkan diantara dua fase (fase diam dan fase gerak). Praktikum mengenai kromatografi ini penting dilakukan agar dapat memahami

bagaimana

konsep

pemisahan

dengan

menggunakan

teknik

kromatografi secara langsung, baik teori-teori kromatografi, cara kerja kromatografi dan mengenai jenis-jenis kromatografi. 1.2 Tujuan

-

Untuk mengetahui sifat pelarut yang digunakan dalam percobaan

-

kromatografi. Mengetahui cara pemisahan dengan menggunakan metode kromatografi

-

kertas. Menentukan harga Rf dari percobaan kromatografi.

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA Kromatografi telah didefinisikan terutama sebagai suatu proses pemisahan yang digunakan untuk pemisahan campuran yang pada hakekatnya molekuler. Kromatogafi bergantung pada pembagian ulang molekul-molekul campuran antara dua fase atau lebih. Tipe-tipe kromatografi mencakup kromatografi adsorpsi, kromatografi partisi cairan dan pertukaran ion. Sistem utama yang digunakan dalam kromatografi partisi adalah: partisi gas, partisi cairan yang menggunakan alas tak bergerak (misalnya kromatografi kolom), kromatografi kertas dan lapisan tipis. Dalam tiap kasus terjadi distribusi antara fase ”cair” yang

terserap secara ”stasioner” dan zat alir bergerak yang kontak secara karib dengan fase cair itu. Dalam kromatografi partisi cairan, fase cair yang bergerak mengalir melewati fase cair stasioner yang diserapkan pada suatu pendukung; dalam kromatografi kertas pendukung itu adalah kertas atau kertas terolah, sedangkan dalam kromatografi lapisan tipis adsorbennya disalutkan pada lempeng kaca atau lembaran plastik. Hanya akan dibahas aspek-aspek yang dipilih dari kromatografi partisi pada selulosa dengan rujukan khusus ke analisis anorganik (Soetiono, 1994). Nilai Rf didefinisikan oleh hubungan: Rf = Jarak (cm) dari garis awal ke pusat zona Jarak (cm) dari garis awal ke garis depan pelarut Harga Rf mengukur kecepatan bergeraknya zona relatif terhadap garis depan pengembang. Kromatografi pada selulosa pada dasarnya adalah proses macam ekstraksi-pelarut; bahan yang akan dipisah mengalami partisi antara fase cair yang terikat dalam matriks selulosa lamban dan pelarut organik yang digunakan sebagai fase mobil. Nilai Rf bersifat karakteristik dari spesi-spesi khusus dalam macam pemisahan apapun yang diketahui. Dalam kromatografi selulosa yang sederhana mekanisme itu umumnya bertipe partisi; proses-proses adsorpsi hanya kecil saja peranannya (misalnya, karena adanya sedikit gugus karboksil dalam kertas), tetapi biasanya efek tersebut tidak nampak bila digunakan pelarut asam kuat (Soetiono, 1994). Pemisahan campuran menjadi komponen-komponennya adalah hal yang penting dalam semua cabang kimia dan tidak kalah pentingnya dalam banyak bidang lain di mana teknik-teknik kimia digunakan untuk memecahkan berbagai macam masalah. Jadi, dampak dari suatu teknik pemisahan yang ampuh dari serba guna akan dirasakan oleh ilmu seluruh pengetahuan modern. Dalam kaitan ini, ketelitian kromatografi jarang sekali ditekankan. Dengan menggunakan metode kromatografi, dalam banyak kasus pemisahan dituntaskan jauh lebih cepat dan lebih efektif daripada sebelumnya, dan banyak pemisahan-pemisahan yang tak pernah dilakukan dengan teknik-teknik lainnya telah berhasil (Underwood, 1998). Dalam semua teknik kromatografi, zat-zat terlarut yang dipisahkan bermigrasi sepanjang kolom (atau, seperti dalam kromatografi kertas atau lapisan tipis, ekivalen fisik kolom), dan tentu saja dasar pemisahan terletak dalam laju

perpindahan yang berbeda untuk larutan yang berbeda. Kita boleh menganggap laju perpindahan sebuah zat terlarut sebagai hasil dari dua faktor, yang lain menahannya. Dalam proses asli Tswett, kecenderungan zat-zat terlarut untuk menyerap pada fasa padat menahan pergerakkan mereka, sementara kelarutannya dalam fase cair bergerak cenderung menggerakkan mereka. Perbedaan yang kecil antara dua zat terlarut dalam kekuatan adsorpsi dan dalam interaksinya dengan pelarut yang bergerak menjadi dasar pemisahan bila molekul-molekul zat terlarut itu berulang kali menyebar diantara dua fase itu ke seluruh panjang kolom (Underwood, 1998). Kromatografi merupakan suatu metode pemisahan yang dewasa ini telah banyak digunakan dibandingkan dengan metode lain seperti destilasi, kristalisasi, pengendapan, ekstraksi dan lain-lain mempunyai keuntungan dalam pelaksanaan yang lebih sederhana, penggunaan waktu yang singkat terutama mempunyai kepekaan yang tinggi serta kemampuan memisahkan yang tinggi. Metode ini dapat digunakan, jika dengan metode lain tidak dapat dilakukan misalnya karena jumlah cuplikan sangat sedikit atau campurannya kompleks (Yazid, 2005). Dalam teknik kromatografi, sampel yang mrupakan campuran dari berbagai macam komponen ditempatkan dalam situasi dinamis dalam sistem yang terdiri dari fase diam dan fase bergerak. Semua pemisahan pada kromatografi tergantung pada serakan relatif dari masing-masing komponen diantara kedua fase tersebut. Senyawa atau komponen yang tertahan (terhambat) lebih lemah oleh fase diam akan bergerak lebih cepat daripada komponen yang tertahan lebih kuat. Perbedaan gerakan (mobilitas) antara komponen yang satu dengan lainnya disebabkan oleh perbedaan adsorpsi, partisi, kelarutan atau penguapann diantara kedua fase. Jika perbedaan-perbedaan ini cukup besar, maka akan terjadi pemisahan secara sempurna. Oleh karena itu dalam kromatografi, pemilihan terhadap fase bergerak maupun fase diam perlu dilakukan sedemikian rupa sehingga semua komponen bisa bergerak dengan kecepatan yang berbeda-beda agar terjadi proses pemisahan (Yazid, 2005). Kromatografi dapat digolongkan berdasarkan pada jenis fase-fase yang digunakan. Dalam kromatografi fase gerak dapat berupa gas atau zat cair dan fase diam dapat berupa gas atau zat cair, maka berdasarkan fase bergerak-fase diam

terdapat empat macam sistem kromatografi, yaitu: Kromatografi gas-cair, kromatograf gas-padat, kromatografi cair-padat dan kromatografi cair-cair (Yazid, 2005). Kromatografi

juga

dapat

didasarkan

atas

prinsipnya,

misalnya

Kromatografi partisi (Partition Chromatography) dan Kromatografi serapan (Adsorption Chromatography). Sedangkan menurut teknik kerja yang digunakan, misalnya lapis tipis (KLT), Kromatografi kertas dan Kromatografi gas (Yazid, 2005). Fase bergerak Gas Cair Cair

Fase diam Padat Padat

Prinsip Adsorpsi Adsorpsi,

Teknik Kerja Kromatografi gas-padat Kromatografi kolom, KLT dan

Cair

Partisi Partisi

kromatografi kertas. Kromatografi Kolom, KLT dan

Kromatografi kertas. Gas Cair Partisi Kromatografi gas-cair Tabel 1 Jenis-jenis Kromatografi Selain cara klasifikasi di atas ada juga yang digabung, misalnya Kromatografi Partisi gas-cair, Kromatografi partisi cair-cair, kromatografi adsorpsi cair-padat dan lain-lain, juga dikenal Kromatografi penukar ion dan Kromatografi filtrasi sel yang prinsipnya berbeda dari prinsip kromatografi yang telah disebutkan sebelumnya (Yazid, 2005). Selulosa fosfat pada hakekatnya adalah selulosa dihidrogen fosfat, dan merupakan penukar dwifungsi yang mengandung baik asam kuat (jadi memerankan resin penukar kation yang bersifat asam kuat) maupun gugus asam sangat lemah. Karboksimetilselulosa dapat dianggap sebagai penukar kation asam lemah yang paling mudah berfungsi pada pH di atas 4-5. Dietilminoetilselulosa mnyerupai resin penukar ion amina-tersier padanannya adalah hal kuat basa; bahan ini tak berfungsi dalam larutan basa kuat, seperti dalam kebanyakan derivat selulosa lain, mayoritas gugus substitusi terletak dekat pada permukaan penukar, dengan demikian memungkinkan pertukaran dengan molekul besar dengan lebih mudah daripada resin penukar yang kuno. Penukar ion selulosa berubah dipasarkan dalam bentuk lembaran kertas maupun bubur (Basset, 1994).

Berbagai ukuran kolom dapat digunakan, dimana hal utama yang dipertimbangkan adalah kapasitas yang memadai untuk menerima sampel-sampel tanpa melampaui fase diamnya merupakan aturan praktis yang umum bahwa panjang kolom harus sekurang-kurangnya sepuluh kali ukuran diameternya. Bahan pengemasnya, suatu adsorben seperti alumina atau mungkin suatu resin pertukaran ion, dimasukkan dalam bentuk suspensi ke dalam porsi fase bergerak dan dibiarkan diam di dalam hamparan basa dengan sedikit cairan tetap berada di atas permukaannya. Keran dibuka, dan permukaan cairan dibiarkan turun sampai mencapai puncak permukaan hamparan; kemudian porsi kecil dari larutan sampel (beberapa puluh milimeter sampai mungkin dua milimeter). Dipipet dengan hatihati ke atas puncak dari hamparan. Reservoir cair dipasang dan kemudian aliran fase gerak dimulai. Laju alir yang diinginkan diperoleh semata-mata dari gravitasi (Day, 2002). Kromatografi lapisan tipis atau TLC (thin-layer chromotoraphy), seperti halnya kromatografi kertas, murah dan mudah dilakukan. Kromatografi ini mempunyai satu keunggulan dari segi kecepatan dari kromatografi kertas. Proses kromatografi lapisan tipis membutuhkan hanya setengah jam saja, sedangkan pemisahan yang umum pada kertas membutuhkan waktu beberapa jam. Kromatografi lapisan tipis sangat terkenal dan rutin digunakan diberbagai laboratorium. Media pemisahannya adalah lapisan dengan ketebalan sekitar 0,1 sampai 0,3 mm zat pada aluminium. Pada adsorben pada lempeng kaca, plastik atau aluminium. Lempeng yang paling umum digunakan adalah alumina, gel, silika dan selulosa (Day, 2002). Penyetimbangan lempeng kromatografi itu tidak perlu dan pengembangan lempeng itu dapat segera dimulai setelah dikeringkan (Soetiono, 1994).

BAB 3 METODOLOGI PERCOBAAN 3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat - 3 buah cawan petri - Pipet tetes - Pensil - Penggaris - Gelas ukur - Lidi - Oven - Gunting 3.1.2 Bahan - Aquadest - Etanol - N-heksana - Tinta spidol merah - Tinta spidol hitam - Tinta spidol biru - Ekstrak pandan - Ekstrak kunyit - Ekstrak mawar - Kertas saring - Kertas label - Tissue

3.2 Prosedur Percobaan 3.2.1 Aquadest - Dipotong kertas saring dengan ukuran 10 cm x 7 cm dengan diberi jarak 1 cm dari batas bawah. - Diberi noda tinta hitam, tinta merah dan tinta biru pada kertas saring beserta ekstrak pandan, ekstrak mawar dan ekstrak kunyit.

- Diberi lidi pada ujung kertas saring agar kertas saring mudah dipegang, saat dicelupkan pada cawan petri. - Dicelupkan kertas saring pada aquadest 20 mL. - Dihentikan proses kromatografi saat pelarut mencapai titik maksimum. - Diukur jarak pelarut. - Dikeringkan dalam oven. - Diukur jarak masing-masing noda dan harga Rf. - Diulangi dengan mengganti pelarut lain. 3.2.2 Etanol - Dipotong kertas saring dengan ukuran 10 cm x 7 cm dengan diberi jarak 1 cm dari batas bawah. - Diberi noda tinta hitam, tinta merah dan tinta biru pada kertas saring beserta ekstrak pandan, ekstrak mawar dan ekstrak kunyit. - Diberi lidi pada ujung kertas saring agar kertas saring mudah dipegang, saat dicelupkan pada cawan petri. - Dicelupkan kertas saring pada etanol 20 mL. - Dihentikan proses kromatografi saat pelarut mencapai titik maksimum. - Diukur jarak pelarut. - Dikeringkan dalam oven. - Diukur jarak masing-masing noda dan harga Rf. - Diulangi dengan mengganti pelarut lain. 3.2.3 N-heksana - Dipotong kertas saring dengan ukuran 10 cm x 7 cm dengan diberi jarak 1 cm dari batas bawah. - Diberi noda tinta hitam, tinta biru dan tinta merah pada kertas saring beserta ekstrak pandan, ekstrak mawar dan ekstrak kunyit. - Diberi lidi pada ujung kertas saring agar kertas saring mudah dipegang, -

saat dicelupkan pada cawan petri. Dicelupkan kertas saring pada n-heksana 20 mL. Dihentikan proses kromatografi saat pelarut mencapai titik maksimum. Diukur jarak pelarut. Dikeringkan dalam oven. Diukur jarak masing-masing noda dan harga Rf.

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1

Tabel Pengamatan

4.1.1 Aquadest Sampel

Jarak Noda

Jarak

Rf

Pelarut Tinta

0 cm

8 cm

0

0 cm

8 cm

0

Tinta biru

0 cm

8 cm

0

Ekstrak

3,5 cm

7,2 cm

0,4861 =

merah Tinta hitam

mawar Ekstrak

0,5 0,5 cm

7,2 cm

kunyit Ekstrak pandan

0,0694 = 0,5

0 cm

7,2 cm

0

4.1.2 Etanol Sampel

Jarak Noda

Jarak

Rf

Pelarut Tinta

2,1 cm

4,1 cm

0,51

0 cm

4,1 cm

0

Tinta biru

2 cm

4,1 cm

0487 = 0,5

Ekstrak

2,5 cm

4,3 cm

0,581 = 0,6

2 cm

4,3 cm

0,4651 =

merah Tinta hitam

mawar Ekstrak kunyit Ekstrak

0,5 1,5 cm

4,3 cm

0,348 = 0,3

Jarak Noda

Jarak

Rf

pandan

4.1.3 N-Heksana Sampel

Pelarut Tinta

0 cm

2 cm

0

T0 cm

2 cm

0

Tinta biru

0,4 cm

2 cm

0,2

Ekstrak

0,3 cm

4,5 cm

0,06

0,5 cm

4,5 cm

0,1

merah Tinta hitam

mawar Ekstrak kunyit

Ekstrak

0 cm

4,5 cm

pandan 4.2

Perhitungan

4.2.1 Perhitungan harga Rf dengan pelarut aquadest – Tinta merah Rf =

= =0

– Tinta hitam Rf =

= =0

– Tinta biru Rf =

= =0

– Ekstrak mawar Rf =

=

= 0,4861

=

= 0,0694

=

=0

– Ekstrak kunyit Rf =

– Ekstrak pandan Rf =

4.2.2 Perhitungan harga Rf dengan pelarut etanol – Tinta merah

0

Rf =

=

= 0,51

=

=0

=

= 0,487

=

= 0,581

=

= 0,4651

=

= 0,348

– Tinta hitam Rf =

– Tinta biru Rf =

– Ekstrak mawar Rf =

– Ekstrak kunyit Rf =

– Ekstrak pandan Rf =

4.2.3 Perhitungan harga Rf dengan pelarut N-heksana – Tinta merah Rf =

= =0

– Tinta hitam Rf =

= =0

– Tinta biru Rf =

=

= 0,2

=

= 0,06

=

= 0,1

=

=0

– Ekstrak mawar Rf =

– Ekstrak kunyit Rf =

– Ekstrak pandan Rf = 4.3

Pembahasan Kromatografi merupakan suatu metode pemisahan fisik, dimana

komponen-komponen yang dipisahkan di distribusikan di antara dua fasa, salah satu fasa tersebut adalah suatu lapisan stasioner dengan permukaan yang luas, yang lainnya sebagai fluida yang mengalir lembut di sepanjang landasan stasioner. Kromatografi merupakan istilah kolektif yang dipakai pada berbagai metode yang nampaknya berbeda dalam beberapa hal namum memiliki beberapa kesamaan fitur yang lazim. Suatu definisi harus menegaskan bahwa komponen-komponen sampel tersebar dimana diantara dua fasa, tetapi ini sendiri tidak mencukupi karena tidak menginginkan istilah tersebut mencakup semua proses pemisahan. Fasa stasioner bisa berupa padatan maupun cairan, sedangkan fasa bergerak bisa berupa cairan maupun gas. Kromatografi merupakan suatu metode fisik yang baik sekali untuk mengamati dan menyelidiki suatu campuran dan pelarutnya. Metode kromatografi didasarkan pada perbedaan migrasi dan distribusi senyawa atau ionion tersebut dalam dua fase yang berbeda (fase gerak dan fase diam). Dua fase ini bisa berwujud padat-cair, cair-cair, atau gas-cair.

Kromatografi berdasarkan teknik yang digunakan dapat digolongkan menjadi: 1) Kromatografi kolom, berdasarkan jenis distribusi fase adsorbsi cair-padat, pemisahan komponen-komponen suatu zat akan terjadi bila dilarutkan dalam satu pelarut yang bergerak melalui fase padat (adsorben), hal ini dikarenakan adanya perbedaan daya adsorbsi komponen-komponen tersebut. Ini biasa digunakan untuk memisahkan komponen-komponen yang terdapat dalam suatu senyawa, tidak untuk menghitung Rf komponen. Perjalanan komponen yang mempunyai daya adsorbsi lebih lemah, akan cepat serta menempuh jarak yang lebih jauh dibandingkan dengan perjalanan komponen yang daya adsorbsinya lebih kuat. 2) Kromatografi kertas, sebagai penyerap digunakan sehelai kertas dengan susunan serabut dan tebal yang sesuai. Pemisahan ini dapat berlangsung menggunakan fase cair tunggal dengan proses yang sama dengan kromatografi adsorbsi dalam kolom. Karenanya kandungan air pada kertas atau selektif dari komponen hidrofilik fase cair oleh serat kertasnya, dapat dianggap sebagai fase diam, maka mekanisme partisi berperan dalam pemisahan. Kromatografi dibuat dengan menotolkan larutan uji, larutan baku pembanding dan suatu campuran uji dan baku pembanding dalam jumlah yang kurang lebih sama pada penyerap dalam satu garis lurus sejajar dengan tepi lempeng atau kertas. Dalam kromatografi menurun pada fase gerak dibiarkan merambat turun pada kertas. Kertas tersebut di gunting dalam bejana menggunakan bahan antisifon yang menahan ujung atas kertas di dalam bak pelarut. 3) Kromatografi lapis tipis merupakan sebuah bentuk dari kromatografi adsorpsi padat-cair yang fase diamnya dilumuri di atas plot. Kromatografi berdasarkan fasenya adalah: 1) Kromatografi gas-cair, fase geraknya adalah gas seperti helium dan fase diamnya adalah cairan yang mempunyai titik didih yang tinggi diserap pada padatan. 2) Kromatografi cair-cair, suatu pemisahan dipengaruhi oleh distribusi sampel antara fase cair diam dan fase cair bergerak dengan membatasi kemampuan pencampuran. Jika suatu zat terlarut dikocok dalam sistem

dua pelarut yang tidak bercampur maka zat terlarut akan terdistribusi diantara kedua fase dan jika kesetimbangan tercapai maka koefisiennya (kd). 3) Kromatografi gas-padat, bila fase geraknya berupa gas dan fase diamnya berupa padatan yang dapat menyerap. 4) Kromatografi cair-padat, bila fase geraknya berupa gas sedangkan fase diamnya berupa padatan yang amorf yang dapat menyerap. Metode kromatografi adalah teknik yang efektif dan dapat digunakan untuk memisahkan komponen yang sulit dipisahkan dengan metode lain. Beberapa zat yang diteteskan pada kertas dapat bergerak pindah lebih cepat daripada yang lain. Kelarutan suatu partikel terhadap pelarutnya mempengaruhi kecepatan perpindahan tersebut. Semakin mudah suatu partikel larut, semakin cepat pula laju geraknya. Suatu campuran pewarna dapat dipisahkan dengan teknik kromatografi karena adanya perbedaan kelarutan antara zat penyusun campuran pewarna tersebut. Selain itu, kecepatan bergerak partikel penyusun sangat dipengaruhi oleh ukuran partikel penyusunnya. Partikel penyusun akan bergerak lebih cepat daripada partikel penyusun yang berukuran lebih besar. Pada teknik kromatografi, sampel merupakan campuran dari berbagai macam komponen ditempatkan dalam situasi dinamis dalam sistem yang terdiri dari fase diam dan fase bergerak. Semua pemisahan pada kromatografi tergantung pada gerakan relatif dari masing-masing komponen diantara kedua fase tersebut. Senyawa atau komponen yang tertahan (tertambat) lebih lemah oleh fase diam akan bergerak lebih cepat daripada komponen yang tertahan lebih kuat. Perbedaan gerakan (mobilitas) antara komponen yang satu dengan lainnya disebabkan oleh perbedaan dalam adsorpsi, partisi, kelarutan atau penguapan di antara kedua fase. Prinsip yang digunakan adalah prinsip kromatografi partisi dapat dijelaskan dengan hukum partisi yang diterapkan pada sistem multikomponen. Dalam kromatografi partisi, ekstraksi terjadi berulang dalam satu kali proses. Dalam percobaan, zat terlarut di distribusikan antara fasa stasioner dan fasa mobil. Fase stasioner dalam banyak kasus pelarut di adsorbsi pada adsorben dan fasa mobil adalah molekul pelarut yang mengisi ruang antar partikel yang teradsorbsi.

Sampel yang di analisis di totalkan ke ujung kertas. Fasa mobil (pelarut) dapat saja beragam. Pelarut pada percobaan ini adalah aquadest, etanol dan n-heksana. Rf atau dapat disebut dengan ratio formation yang digunakan sebagai nilai perbandingan relatif antar sampel. Jarak antara pelarut bersifat relatif. Oleh karena itu, diperlukan suatu perhitungan tertentu untuk memastikan spot yang terbentuk memiliki jarak yang sama walaupun ukuran jarak plotnya berbeda. Nilai Rf juga menyatakan derajat retensi suatu komponen dalam fase diam sehingga nilai Rf sering disebut faktor retensi. Nilai Rf dapat dihitung dengan rumus: Rf = Semakin besar nilai Rf dari sampel maka semakin besar pula jarak bergeraknya senyawa tersebut pada alat kromatografi lapis tipis. Nilai Rf dapat dijadikan bukti dalam mengidentifikasikan senyawa. Bila nilai Rf memiliki nilai yang sama maka senyawa tersebut dapat dikatakan memiliki karakteristik yang sama atau mirip. Sedangkan, bila nilai Rf-nya berbeda, senyawa tersebut dapat dikatakan merupakan senyawa yang berbeda. Fungsi perlakuan kertas yang dicelupkan dan ditotoli oleh tinta maupun ekstrak adalah untuk melihat perubahan yang terjadi pada kertas yang telah ditotoli oleh tinta dan ekstrak apakah berubah atau tidak, dan fungsi perlakuan di oven atau di panaskan adalah untuk mengeringkan kertas tersebut agar dapat menghitung jarak perubahan antara jarak noda dan jarak pelarut, serta fungsi perlakuan di celupkan ke dalam 3 larutan yang berbeda yaitu aquadest, etanol, dan n-heksana. Fungsi reagen dari tinta adalah digunakan sebagai bahan percobaan atau sebagai titik noda yang di totoli pada kertas saring tersebut, karena tinta sebagai objek yang diamati dalam percobaan ini, begitu pula dengan fungsi ekstrak, yang digunakan sebagai titik noda yang ditotoli kertas saring, karena ekstrak merupakan objek yang akan diamati dalam percobaan. Hasil pengamatan yang dilakukan dengan pelarut aquadest adalah hanya ekstrak mawar dan ekstrak kunyit yang mengalami perubahan. Ini terjadi karena aquadest bersifat polar sedangkan diantara objek yang lain kebanyakan tidak bisa naik. Karena sifat atau sampel dengan pelarut tidak sejenis. Hasil pengamatan dengan menggunakan n-heksana adalah hanya ekstrak mawar dan ekstrak kunyit

yang mengalami perubahan, hal ini disebabkan sampel dan pelarut memiliki sifat yang tidak sejenis. Kemudian hasil-hasil pengamatan dengan alkohol semua sampel mengalami perubahan kecuali tinta hitam, karena pelarut bersifat semi polar, sehingga sifat dari sampel dan pelarut adalah sejenis. Nilai Rf dari hasil pengamatan pada sampel adalah semakin dekat dengan angka 1, maka sifat mereka (sampel sama). Polar pada hasil pengamatan adalah tidak dekat dengan angka 1, yaitu ekstrak mawar pada pelarut aquadest, tinta merah, tinta biru, ekstrak mawar, dan ekstrak kunyit pada pelarut alkohol. Sifat polar pada hasil pengamatan adalah dekat dengan angka 1, yaitu semua sampel kecuali ekstrak mawar pada pelarut aquadest, tinta hitam dan ekstrak pandan pada pelarut alkohol, dan semua sampel pada pelarut n-heksana. Aplikasi dalam kehidupan sehari-hari, yaitu: 1) Dalam bidang bioteknologi, kromatografi mempunyai peranan penting misal dalam penentuan senyawa dalam protein. 2) Dalam bidang klinik, teknik ini sangat bermanfaat terutama dalam menginvestigasi fluida badan seperti air liur. 3) Dalam bidang forensik, sangat membantu terutama dilihat dari segi kemanan menganalisis kandungan bahan peledak. 4) Pada bidang lingkungan, peran paling penting seperti mengetahui jenis anion dan kation yang terkandung dalam sampel air tersebut sekaligus jumlahnya. 5) Dalam bidang pertambangan, seperti mendeteksi batu bara. Faktor kesalahan dalam percobaan ini adalah kekurangpastian dalam pencelupan kertas saring, kurang tepat dalam menotolkan noda, pelarutnya tercemar oleh larutan lain sehingga larutannya tercemar, dan noda yang digunakan sudah terkontaminasi sehingga tidak akurat, serta kesalahan dalam melakukan prosedur percobaan. Dalam percobaan ini digunakan 3 pelarut yakni aquadest, alkohon dan nheksana. Ketiga pelarut tersebut memiliki sifatnya masing-masing untuk memiliki sifat dan karakteristik sebagai berikut: – Mudah mendidih pada suhu 100°C – Bersifat polar – Tidak mengalirkan alur listrik

– Bersifat cair – Dapat digunakan sebagai pelarut yang baik – Berfungsi sebagai pelarut senyawa-senyawa polar Sifat karakteristik dari pelarut alkohol: – Mudah terbakar – Mudah bercampur dengan air – Bentuk fasa pada suhu ruang a. Dengan C1-4 berupa gas dan cair b. Dengan C5-9 berupa cairan kental (minyak) c. Dengan C10 atau lebih berupa zat padat Sifat karakteristik dari aquadest: – Larutan bening seperti air – Tidak berbahaya apabila terkena kulit – Bersifat cair – Sebagai pelarut yang baik Sifat karakteristik N-heksana: – Bersifat non polar dan mudah menguap – Bersfiat korosit (tidak baik untuk tubuh)

BAB 5 PENUTUP

5.1

Kesimpulan

–

Larutan yang digunakan mempunyai sifat yang berbeda-beda, diantaranya:

–

a. Aquadest bersifat polar b. Alkohol bersifat semi polar c. N-heksana bersifat non-polar Pemisahan dengan metode kromatografi kertas dilakukan dengan cara menotolkan sampel pada kertas saring kemudian memasukkan kertas saring ke dalam chamber yang berisi eluen dengan perbandingan pelarut

–

tertentu. Harga Rf dapat dihitung dengan menggunakan rumus: Rf =

5.2

Saran

–

Dalam praktikum selanjutnya disarankan untuk juga memakai 2 jenis tinta,

–

yaitu tinta permanen dan tidak permanen. Jenis pelarutnya sebaiknya ditambah juga misal kloroform agar dapat lebih mengetahui perbedaan harga Rf-nya.

DAFTAR PUSTAKA

Basset, J, et al. 1994. Buku Ajar Vogel Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Jakarta: Buku Kedokteran EGC. Day, R. A, JR, et al. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif. Jakarta: Erlangga. Soetiono, L. dan Hadyana. A. P. 1994. Kimia Analisis Kuantitatif Anorganik. Jakarta: UIP. Underwood, A. L. 2002. Analisis Kimia Kuantitatif Edisi Keenam. Jakarta: Erlangga. Yazid, Estien. 2005. Kimia Fisika untuk Paramedis. Yogyakarta: Andi.