Perbedaan Validasi Dan Verifikasi 2o204j

APA PERBEDAAN VALIDASI & VERIFIKASI METODE ANALISIS?

oleh: S.V. Tokan

Validasi

Verifikasi

Apa itu VALIDASI METODE ANALISIS?

Apa itu VERIFIKASI METODE ANALISIS?

DEFINISI VALIDASI ISO/IEC 17025 Klausul 5.4.5.1

• konfirmasi melalui pengujian dan pengadaan bukti yang obyektif bahwa persyaratan tertentu untuk suatu maksud khusus dipenuhi • confirmation by examination and provision of objective evidence that the particular requirements for a specific intended use are fulfilled

DEFINISI VALIDASI VIM • verification, where the specified requirements are adequate for an intended use

DEFINISI VALIDASI PEMERIKSAAN KLINIK

Confirmation, through the provision of objective evidence, that the requirements for a specific intended use or application have been fulfilled (ISO 15189:2012 Klausul 3.26)

DEFINISI VALIDASI

Fitness for Purpose

MENGAPA VALIDASI METODE DIPERLUKAN? • Pentingnya pengujian • Dampak dari hasil uji

METODE YANG HARUS DIVALIDASI? • Metode tidak baku • Metode yang dikembangkan lab • Metode baku di luar lingkup • Metode baku yang dimodifikasi

VERIFIKASI METODE ANALISIS Laboratorium harus memastikan bahwa dapat menggunakan metode standar dengan baik sebelum melakukan pengujian atau kalibrasi. Jika ada perubahan metode standar, harus dilakukan konfirmasi ulang

VERIFIKASI prosedur pemeriksaan klinik:

Konfirmasi melalui pengujian dan penyediaan bukti objektif untuk memastikan bahwa klaim kinerja suatu prosedur pemeriksaan telah terpenuhi. (ISO 15189:2012 klausul 5.5.1.2, dengan penyesuaian) Confirmation, through provision of objective evidence, that specified requirements have been fulfilled (ISO 15189:2012 klausul 3.27)

VERIFIKASI prosedur pemeriksaan klinik

Lab harus: Memilih prosedur pemeriksaan yang telah tervalidasi untuk tujuan penggunaannya. (ISO 15189:2012 klausul 5.5.1.1)

VERIFIKASI prosedur pemeriksaan klinik

Lab harus: Melakukan verifikasi sebelum menggunakan prosedur yang telah tervalidasi (tanpa modifikasi) secara rutin. (ISO 15189:2012 klausul 5.5.1.2)

VERIFIKASI prosedur pemeriksaan klinik

Lab harus: Mendapatkan informasi dari pembuat prosedur untuk mengkonfirmasi karakteristik kinerja dari prosedur. (ISO 15189:2012 klausul 5.5.1)

PEDOMAN VALIDASI METODE ANALISIS Eurachem Guide: The Fitness for Purpose of Analytical Methods – A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics, 2014

SEBELUM VALIDASI/VERIFIKASI METODE ANALISIS

• Pastikan peralatan telah terkalibrasi • Pastikan personil sudah kompeten dan terbiasa melaksanakan metode analisis

PEDOMAN VALIDASI METODE ANALISIS ISO 5725 Accuracy (trueness and precision) of measurement methods and results Part 1 - 6

KARAKTER KINERJA METODE Rentang ukur dan akurasi nilai yang diperoleh dari metode yang divalidasi (ISO/IEC 17025:2005 Klausul 5.4) Misalnya: • ketidakpastian hasil, • batas deteksi, • selektivitas metode,

KARAKTER KINERJA METODE Misalnya (lanjutan): • linieritas, • batas dari repitabilitas dan/atau reproduksibilitas, • kehandalan (robustness) terhadap pengaruh eksternal • sensitivitas silang terhadap gangguan dari matriks contoh (sample)/barang yang diuji

VALIDASI prosedur pemeriksaan klinik

Karakteristik kinerja dari prosedur yang perlu dibuktikan (ISO 15189:2012): • Precision (Repeatability & Intermediate Precision) • Detection Limit • Trueness • Quantitation Limit • Accuracy • Measuring interval • Uncertainty • Diagnostic • Analytical Specificity specificity • Analytical Sensitivity • Diagnostic sensitivity

KARAKTER KINERJA METODE (EURACHEM) • Selectivity • LOD dan LOQ • Working (& Linear) range • Analytical sensitivity

KARAKTER KINERJA METODE (EURACHEM) (2) • Trueness • Precision • Measurement uncertainty • Ruggedness

RELASI KARAKTER KINERJA METODE No. 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9.

Eurachem Selectivity LOD LOQ Working (& Linear) Range Analytical Sensitivity Trueness Precision Measurement Uncertainty

Lain Selectivity / Specificity LOD LOQ Linearitas Accuracy Precision

Ruggedness

Ruggedness/Robustness

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

1. Selectivity “the extent to which the method can be used to determine particular analytes in mixture or matrices without interferences from other components of similar behaviour”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

1. Selectivity Sering disebut juga Specificity

Selectivity Yang harus dilakukan Analisis sampel uji, dan RM dengan metode kandidat dan metode lain yg independen

Analisis sampel uji yang mengandung beberapa interferen yang diduga dapat mengganggu saat ada analit

Jumlah Uji

1

1

Yang harus dihitung/ditentukan dari data

Keterangan

Dari hasil uji, nilai kemampuan metode mengkonfirmasi identitas analit dan kemampuan mengukur analit yang benar terpisah dari interferen

Tentukan bukti pendukung yang terkait untuk memberikan tingkat kepercayaan yang memadai

Tetapkan efek dari interferen. Apakah keberadaannya mengurangi deteksi atau kuantifikasi analit?

Jika deteksi atau kuantifikasi terhalangi oleh interferen, maka pengembangan metode lanjutan perlu dilakukan

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ LOD: “lowest concentration of the analyte that can be detected by the method at a specified level of confidence”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ LOQ: “lowest level at which the performance is acceptable for a typical application”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ

LOD dan LOQ ditetapkan dari Standard Deviation deteksi dari sampel.

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ Sampel untuk uji LOD dan LOQ: 1. Blank Sample (cocok untuk spektrofotometri dan AAS) 2. Sampel dengan konsentrasi analit yang sangat kecil (sangat dekat atau dibawah dugaan LOD). Dibuat dengan spiking di blank sample.

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ

Instrumen Detection Limit vs Method Detection Limit

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

2. LOD dan LOQ IDL: Diukur dengan blanko reagent yang langsung dimasukkan ke instrumen tanpa proses preparasi, atau diukur dengan signal to noise ratio. MDL: Diukur dengan analisis sampel yang melalui seluruh rangkaian prosedur pengujian. MDL  LOD

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

3. Working (and Linear) Range “ suatu rentang dimana metode memberikan hasil dengan ketidakpastian yang masih dapat diterima”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

3. Working (and Linear) Range

•Batas bawah working range adalah LOQ. •Batas atas adalah konsentrasi dimana sensitivitas analisis mulai menunjukkan anomali yang signifikan

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

4. Analytical Sensitivity “perubahan respon instrumen yang berhubungan dengan perubahan dari besaran yang diukur (konsentrasi analit)”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

4. Analytical Sensitivity Contoh: • Gradient dari kurva respon

Analytical sensitivity teoretis seringkali telah diketahui, contoh: dalam pengukuran pH, elektrode selektif ion menunjukkan teori Nernst, yaitu perubahan sebesar 59 mV/pH.

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

5. Trueness “Ekspresi seberapa dekat rata-rata nilai hasil uji terhadap nilai standar”

Trueness diukur secara praktis dengan “bias”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

5. Trueness Tiga karakteristik kinerja yang saling berhubungan: 1. Trueness 2. Precision 3. Uncertainty

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

5. Trueness Akurasi: “kedekatan hasil pengujian tunggal dengan nilai standar” Akurasi diinvestigasi dengan menilai systematic dan random error Akurasi ditetapkan melalui dua komponen: • Trueness • Presicion

TRUENESS

TRUENESS

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

6. Precision “ukuran kedekatan hasil uji antara satu dengan yang lainnya”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

6. Precision •Repeatability •Intermediate precision •Reproducibility

Precision Perlakuan

Rep

Yang dihitung dari data

Catatan

10

Simpangan baku (s) pada setiap konsentrasi

Repeatabitilty s untuk setiap konsentrasi

10

Simpangan baku (s) pada setiap konsentrasi

Intra-laboratory Reproducibility s untuk setiap konsentrasi

10

Simpangan baku (s) pada setiap konsentrasi

Inter-laboratory Reproducibility s untuk setiap konsentrasi

Standar atau bahan acuan atau blanko contoh (yang kedalamnya ditambah analit dengan berbagai C berbeda) Analis, peralatan, laboratorium sama. Skala waktu analisa pendek Analis, peralatan, laboratorium sama. Skala waktu analisa panjang Analis, peralatan, laboratorium beda Skala waktu analisa panjang

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

7. Measurement Uncertainty “Bentangan hasil ukur dimana terdapat nilai benar”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE

8. Ruggedness “Ukuran kapasitas metode analisis untuk tetap tidak terpengaruh oleh variasi yang kecil tetapi disengaja pada parameter metode”

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE Ruggedness memberikan indikasi ketahanan metode selama penggunaan normal.

Uji Ruggedness melibatkan perubahan kondisi yang disengaja pada metode dan mengivestigasi dampaknya pada kinerja.

DEFINISI KARAKTER KINERJA METODE Ruggedness terutama harus dilakukan untuk metode yang dikembangkan sendiri, metode yang diadaptasi dari literatur ilmiah, dan metode standar yang digunakan diluar cakupannya

UNTUK DISKUSI/PELATIHAN: S.V. TOKAN 08176832687 / 081293477378 [email protected]